上皮性卵巢癌（EOC）是最常见的女性肿瘤致死性疾病，EOC一般缺乏早期症状，通常在确诊时已伴有广泛盆腔种植播散，难以通过手术完全清除，约65%的患者会在明确诊断后5年内因复发和化疗耐药而死亡。与其它肿瘤不同，EOC的转移方式主要是在腹水中漂浮生长和盆腔内种植转移。腹膜腔播散通常会导致EOC的临床分期增高、肿瘤减灭术不满意和患者生存率大幅度下降。因此，临床迫切需要研究EOC腹膜扩散机制，寻找有效生物标记物和敏感治疗靶标，以此来改善和提高EOC患者预后及临床疗效。

2020年5月25日，北京大学基础医学院病理系/北京大学第三医院病理科刘从容主任医师/副教授与北京大学系统生物医学研究所吴聪颖研究员合作在Protein & Cell在线发表了题为“Loss of 4.1N in epithelial ovarian cancer results in EMT and matrix-detached cell death resistance”的研究论文。该团队首次发现4.1N蛋白对EOC的恶性生物学行为具有负性调控作用，4.1N缺失会减少14-3-3的降解并可诱导entosis（细胞内侵）的发生，借此促进EMT和失巢凋亡逃逸，最终上调EOC的腹膜腔播散能力。单独或联合应用4.1N过表达、14-3-3拮抗剂和ROCK抑制剂有望作为EOC治疗新策略的备选靶点。

该团队首先收集268例EOC石蜡组织样本，运用免疫组化检测4.1N蛋白表达情况，并与EOC患者临床相关性进行分析，发现4.1N的蛋白表达水平在FIGO III期和IV期病例中显著低于I期病例，Kaplan-Meier生存分析显示，在本组EOC样本中，4.1N低表达组出现复发的时间显著早于高表达组，4.1N低表达组的总生存期显著低于高表达组。

该研究进一步探讨了EOC细胞中4.1N表达对EMT生物学行为的影响，发现4。1N表达缺失正性调控EOC细胞的EMT分子表型及迁移和侵袭能力；在贴壁培养条件下，4.1N表达水平对细胞凋亡缺乏显著影响，考虑到EOC细胞播散进入腹腔后将面临失巢凋亡的挑战，研究者在模拟细胞-基质失黏附的环境后，再次检测了细胞的凋亡情况，发现4.1N的表达缺失导致EOC细胞凋亡率显著降低。

随后，研究者对上述生物学机制进行了详细的研究，首先利用Co-IP/LC-MS/MS、Co-IP、Gst-pulldown和免疫荧光实验，发现4.1N与14-3-3具有物理上的相互作用，进一步实验发现4.1N在蛋白水平和mRNA水平上均可负性调控14-3-3，而这种负性调控是通过4.1N促进14-3-3的降解引起的，并且4。1N对EMT和失巢凋亡的调控依赖于14-3-3。

另外，研究者在探讨4.1N对EOC细胞生物学行为影响的过程中发现，在失黏附培养条件下，4.1N的表达缺失可以诱导EOC细胞发生细胞内侵（entosis），即一个细胞入侵另一个相邻细胞继发形成的细胞内细胞结构。进一步的实验研究表明，entosis不会显著影响失黏附培养下EOC细胞的死亡；4.1N表达与4.1N缺失细胞之间并没有通过entosis形成竞争关系，仅在4.1N缺失的细胞中高频发生；借助entosis的生物学行为，4.1N缺失细胞对丧失基质黏附所诱导细胞死亡（失巢凋亡）的逃逸能力显著增加。综上，4.1N缺失可以通过正向调控entosis促进EOC演进的关键步骤-腹膜腔种植转移的发生。

最后，研究者在裸鼠腹腔种植转移模型和EOC患者组织样本中进行体内验证，得出了与上述结果一致的结论。

综上所述，该研究为EOC腹膜腔播散提出了新机制，也为EOC治疗提供了全新思路和备选靶点。

刘从容主任医师/副教授和吴聪颖研究员为该论文的通讯作者。王丹丹（博士生）和张乐天（博士生）为该论文的共同第一作者。

（基础医学院）

编辑：玉洁